生物大分子药物早期发现

检测概述

2022-11-30 17:00:02     TAG:

  

  (1)抗体药物早期发现

  鼠源抗体

  嵌合抗体

  人源化抗体 (CDR移植,定点突变)

  双特性抗体(e.g. CD3, PDL-1)

  抗体片段(e.g. ScFv, Fab)

  (2)表达纯化

  重组蛋白表达 Ecoli, CHO

  蛋白偶联标记:生物素、酶或荧光偶联

  杂交瘤抗体少量制备:体外(转瓶)或体内(腹水)

  抗体纯化:抗原亲和吸附、离子交换、Protein A/G/L

  抗体生产:瞬时转染 HEK293, CHO,稳转细胞株构建

  (3)单抗,多抗,及双抗

  基因密码子修饰,表达纯化

  多动物种属:SPF级小鼠、兔、豚鼠

  AAALAC 动物设施

  弗氏佐剂免疫,快速免疫

  细胞融合及亚克隆筛选

  杂交瘤抗体可变区测序分析

  双抗构建 iPhaseCross平台技术

  (4)鉴定及鉴别

  含量分析(UV-Vis A280, BCA)

  纯度:SDS-PAGE, HPLC

  抗体亚型鉴定

  种属特异性

  结合活性/亲和力: EC50, KD, Kd, Ka (ELISA,BlitZ)

  双特异性抗体结合活性

  中和活性:IC50

  (5)抗药性抗体ADA

  免疫方法开发

  筛选试验

  确证试验

  滴度试验

  中和试验

  试剂盒定制生产

  (6)生物活性及功能

  ADCC和 CDC试验

  细胞迁移, 细胞增殖, 细胞毒性试验

  细胞因子激活试验

  信号转导,蛋白磷酸化试验

  报告基因检测

  双特异性抗体的结合试验

  靶点选择性

  体内PD和PK研究:大鼠,小鼠,犬,猴

北检院检测优势

  检测周期短

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